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口腔支原體體外培養的關鍵影響因素及優化策略_abio生物試劑品牌網

abiopp7個月前 (05-29)技術56

養過支原體的都知道,其實支原體入門難,熟練容易,精通難。培養基不出錯,操作嚴格按照sop不去偷懶私自自我創造就都可以養出來。

回到問題,口腔支原體屬于比肺炎難養一些的支原體,原因主要在口腔支原體本身的特點:

  1. 對營養的強要求性
  2. 本身支原體需要落腳點

詳解:

  • 營養的強要求

血清是否使用了劣質血清,國產血清或者新生牛血清,血清對支原體生長有很明確的作用,在肺炎支原體的培養中,在使用了澳洲新生牛血清對比澳洲胎牛的情況下,會出現至少CFU 30%的差距,而口腔的情況則會出現生長衰弱甚至長期不生長。如果想要彌補血清的差距可以通過添加幾種生長因子進行一定程度的補救。

干粉的配方不科學或者原材料使用便宜國產貨。23714在營養需求方面存在更苛刻,對優質動物蛋白、脂類等存在大量需求,如果配方使用大量植物性蛋白一定會對支原體生長有影響(請參考支原體發生的原生環境——讓吃肉的去吃豆子,身體好的還可以湊合,身體差的直接最后一代)。國產培養基在細菌領域的差距較小主要在大部分細菌更皮實且大部分常規CP細菌為常見環境中就有的,因此,國產使用廉價原料影響微乎其微,但是支原體的情況就會出現某些差距,而這些差距就會在口腔、豬鼻以及滑液支原體中直接以不生長的形式體現。

國產培養基由于含有氨基酸成分在,因此后期會因為氨基酸降解而出現液體培養基變紅的情況,而且部分氨基酸的在熱狀態下極不穩定,因此會出現在短期就降解的速度遠大于口腔吸收的速度,結果就是口腔在液體培養基中還沒怎么生長,結果氨基酸就差不多分解完,并且液體也變紅了,那么在接下來傳代的過程中的10ml提取1ml接種新培養基就會變成變相稀釋(如果新液體培養基與老培養基同期配置也有氨基酸選擇不當的情況,那么新培養基的氨基酸含量也岌岌可危),因此請不要因為以往培養細菌可以使用廉價培養基,也認為同是微生物的支原體也可以廉價培養基湊合。

  • 本身生長需要落腳點

大部分支原體適合搖瓶增菌(效果比靜止更好),但口腔更適合有落腳點的地方培養,所以,口腔在剛接種液體培養基的時候請抑制住躁動的心,不要動手拿進拿出,想要觀察可以通過放置陰性對照的顏色對比。

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