在日常細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞計(jì)數(shù)是不可或缺的一步。然而，看似簡(jiǎn)單的計(jì)數(shù)，背后卻隱藏著不少“雷區(qū)”。本期我們整理了細(xì)胞計(jì)數(shù)中常見的問題、原因分析及快速解決方案，助你提升實(shí)驗(yàn)效率！

1. 常見的問題、原因分析及快速解決方案
1.1 計(jì)數(shù)誤差大、重復(fù)性差
#可能原因

• 混勻不充分，細(xì)胞分布不均
• 使用血球計(jì)數(shù)板時(shí)進(jìn)樣不規(guī)范
• 細(xì)胞團(tuán)聚，單細(xì)胞比例低

#快速解決方案

• 吹打混勻 ≥5次再取樣
• 加入DNA酶（如DNase I）或EDTA防止細(xì)胞團(tuán)聚
• 規(guī)范操作，避免氣泡進(jìn)入計(jì)數(shù)板

1.2 死細(xì)胞比例過高
#可能原因

• 胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞膜受損
• 離心力過大或時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞受損
• 計(jì)數(shù)染料（如臺(tái)盼藍(lán)）濃度不合理

#快速解決方案

• 嚴(yán)控消化時(shí)間，推薦1–3分鐘觀察狀態(tài)
• 軟離心（300–400g，3–5分鐘）
• 使用新鮮、適當(dāng)濃度的染料（臺(tái)盼藍(lán) 0.4%常規(guī)推薦1:1稀釋）

1.3自動(dòng)計(jì)數(shù)系統(tǒng)識(shí)別異常
#可能原因

• 背景雜質(zhì)較多或氣泡干擾
• 設(shè)置參數(shù)不匹配細(xì)胞類型
• 圖像聚焦不清晰，識(shí)別誤判

#快速解決方案

• 預(yù)過濾細(xì)胞懸液（如40 μm濾網(wǎng)）
• 調(diào)整識(shí)別閾值、大小范圍等算法參數(shù)
• 確保樣本放置平穩(wěn)、系統(tǒng)自動(dòng)對(duì)焦良好

2. 技術(shù)加分項(xiàng)：提升計(jì)數(shù)質(zhì)量的小技巧

• 細(xì)胞懸液濃度控制在 1×10? – 1×10?/mL，利于計(jì)數(shù)準(zhǔn)確
• 定期校準(zhǔn)自動(dòng)計(jì)數(shù)儀器或更換血球板
• 使用帶有自動(dòng)識(shí)別和圖像記錄功能的系統(tǒng)，如NanoEntek EVE明場(chǎng)系列/ADAM熒光系列細(xì)胞計(jì)數(shù)分析儀，可視化追蹤細(xì)胞狀態(tài)

細(xì)胞計(jì)數(shù)是一個(gè)“看起來簡(jiǎn)單、做起來精細(xì)”的步驟。掌握關(guān)鍵細(xì)節(jié)，避免常見誤區(qū)，能顯著提升后續(xù)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。

接下來將介紹一款世界質(zhì)量認(rèn)證白金獎(jiǎng)自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀——EVE? PLUS 超快速自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，助力實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確高效、減少誤差。

3. 設(shè)備速覽 EVE? PLUS超快速自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)原理主要基于圖像分析技術(shù)，結(jié)合染色和先進(jìn)的算法來實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。以下是其主要工作原理：

#1 臺(tái)盼藍(lán)染色
在進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，細(xì)胞樣本與臺(tái)盼藍(lán)染料混合。健康的細(xì)胞具有完整的細(xì)胞膜，其能夠阻止臺(tái)盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部,但當(dāng)細(xì)胞死亡或者細(xì)胞膜受損時(shí)，臺(tái)盼藍(lán)則能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)從而染色細(xì)胞質(zhì)使其呈現(xiàn)藍(lán)色。

#2 LED光學(xué)系統(tǒng)與CMOS檢測(cè)技術(shù)
# LED光學(xué)系統(tǒng)

LED光源為細(xì)胞提供均勻且穩(wěn)定的照明環(huán)境，有助于提高圖像質(zhì)量和清晰度。

# CMOS檢測(cè)技術(shù)

結(jié)合高靈敏度的CMOS傳感器，EVE? PLUS能夠捕捉并記錄圖像。CMOS傳感器具有高速、高靈敏度和低噪聲等優(yōu)點(diǎn)，能夠確保圖像數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。

#3 圖像分析
EVE? PLUS內(nèi)置的系統(tǒng)算法會(huì)對(duì)捕捉到的圖像進(jìn)行分析。通過識(shí)別圖像中的細(xì)胞形態(tài)和染色特征（如臺(tái)盼藍(lán)染色的藍(lán)色細(xì)胞）區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。

#4 計(jì)數(shù)與數(shù)據(jù)輸出
根據(jù)圖像分析的結(jié)果，EVE? PLUS自動(dòng)計(jì)算出樣本中的細(xì)胞總數(shù)、活/死細(xì)胞數(shù)以及細(xì)胞活率，并以圖表及圖片格式輸出。

4. 功能簡(jiǎn)介

EVE? PLUS超快速自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀作為一款先進(jìn)的細(xì)胞分析設(shè)備，能夠準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單、快速的提供細(xì)胞數(shù)量以及細(xì)胞存活率。其功能具體如下：

4.1 細(xì)胞計(jì)數(shù)&存活率分析
EVE? PLUS超快速自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀通過臺(tái)盼藍(lán)染色，可獲得活/死細(xì)胞數(shù)量以及細(xì)胞存活率。

4.2 手動(dòng)&自動(dòng)聚焦功能
# 自動(dòng)聚焦

10秒內(nèi)獲得細(xì)胞總數(shù)、活/死細(xì)胞數(shù)、存活率、細(xì)胞濃度和細(xì)胞直徑大小等結(jié)果。

# 手動(dòng)聚焦

1秒內(nèi)獲得細(xì)胞總數(shù)、活/死細(xì)胞數(shù)、存活率、細(xì)胞濃度和細(xì)胞直徑大小等結(jié)果。

4.3 細(xì)胞大小閥門調(diào)節(jié)
EVE? PLUS可自定義調(diào)整細(xì)胞大小閥門。通過調(diào)整閥門大小可排除細(xì)胞碎片干擾。

4.4 成團(tuán)細(xì)胞單獨(dú)計(jì)數(shù)
EVE? PLUS能夠識(shí)別和計(jì)數(shù)成團(tuán)細(xì)胞中的單個(gè)細(xì)胞，從而進(jìn)行準(zhǔn)確的分析。

4.5 數(shù)據(jù)存儲(chǔ)
細(xì)胞計(jì)數(shù)完成后，結(jié)果可自動(dòng)存儲(chǔ)在設(shè)備中，避免數(shù)據(jù)丟失。

4.6 網(wǎng)絡(luò)連接
EVE? PLUS提供網(wǎng)卡，可連接WIFI進(jìn)行郵件發(fā)送或者遠(yuǎn)程操作。