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豬輪狀病毒VP7蛋白的核心功能、特性與應用介紹_abio生物試劑品牌網(wǎng)

abiopp5個月前 (07-02)技術73

豬輪狀病毒(Porcine Rotavirus,PRV)VP7 蛋白是輪狀病毒外層衣殼的主要結構蛋白,由病毒基因組第 7、8 或 9 節(jié)段(不同毒株節(jié)段編號可能不同)編碼,是決定病毒血清型(G 型)的關鍵抗原,在病毒入侵宿主細胞、免疫原性及疫苗研發(fā)中具有核心地位。

一、基本信息
蛋白名稱:豬輪狀病毒 VP7 蛋白(Porcine Rotavirus VP7 Protein)
基因來源:PRV 基因組的第 7-9 節(jié)段(雙鏈 RNA),不同毒株的編碼節(jié)段存在差異。
蛋白定位:位于輪狀病毒三層衣殼的最外層,是病毒粒子表面的主要糖蛋白。
分子特征:
分子量約為 38-42 kDa,屬于糖蛋白,存在 N - 糖基化修飾。
序列變異性較高,根據(jù)其抗原性差異可將輪狀病毒分為不同 G 血清型(如 G1-G27 等),豬輪狀病毒常見血清型包括 G3、G4、G5、G9 等。

二、核心功能特性
病毒入侵宿主細胞
VP7 蛋白通過與宿主腸道上皮細胞表面的受體(如唾液酸、整合素等)結合,介導病毒粒子吸附并進入細胞,是輪狀病毒感染的關鍵第一步。
血清型決定因子
VP7 蛋白的抗原表位具有高度特異性,其氨基酸序列的變異直接決定輪狀病毒的 G 血清型,不同 G 型之間的交叉免疫保護較弱,這也是輪狀病毒感染防控的難點之一。
免疫原性
是誘導機體產(chǎn)生中和抗體的主要靶標,中和抗體可通過識別 VP7 的抗原表位,阻斷病毒與宿主細胞的結合,從而抑制感染。
其誘導的免疫應答具有型特異性,即針對某一 G 型 VP7 的抗體對其他 G 型病毒的交叉保護有限。

三、主要應用
血清型鑒定與流行病學調(diào)查
利用 VP7 的型特異性,通過檢測 VP7 基因序列或其誘導的特異性抗體,可對豬輪狀病毒流行毒株進行 G 型分型,明確當?shù)貎?yōu)勢血清型,為防控策略制定提供依據(jù)。
疫苗研發(fā)
作為主要保護性抗原,VP7 是單價或多價亞單位疫苗的核心成分(如包含流行 G 型的 VP7),誘導針對特定血清型的中和抗體。
在減毒活疫苗或重組疫苗中,VP7 的表達水平直接影響疫苗的免疫效果。
診斷試劑開發(fā)
針對特定 G 型 VP7 的抗原或抗體,可開發(fā)型特異性 ELISA、膠體金試紙條等檢測工具,用于區(qū)分不同血清型感染,輔助臨床診斷。
基礎研究
用于探究輪狀病毒的宿主嗜性(不同 G 型 VP7 與宿主受體的結合差異)、病毒變異機制(如 VP7 基因重組或突變對血清型的影響)等。

四、制備方法
VP7 蛋白可通過多種表達系統(tǒng)制備,具體流程如下:
基因克隆:從 PRV 陽性樣本中擴增特定 G 型的 VP7 基因,插入原核或真核表達載體(如 pET-28a、桿狀病毒表達載體)。
蛋白表達:
原核表達(如大腸桿菌):成本低、產(chǎn)量高,但糖基化修飾缺失可能影響抗原性,需驗證其免疫活性。
真核表達(如昆蟲細胞、畢赤酵母):可實現(xiàn)糖基化等翻譯后修飾,更接近天然蛋白的結構和抗原性,適合疫苗或診斷抗原制備。
純化與鑒定:通過親和層析(如 His 標簽)純化蛋白,經(jīng) SDS-PAGE 驗證分子量,Western blot 或中和試驗驗證其抗原性和中和活性。

五、研究意義
豬輪狀病毒是仔豬病毒性腹瀉的首要病原之一,而 VP7 蛋白作為其血清型決定因子和主要中和抗原,是理解病毒傳播規(guī)律、開發(fā)精準診斷工具和高效疫苗的核心靶點。針對優(yōu)勢血清型 VP7 的研究和應用,能有效提升豬輪狀病毒感染的防控效率,減少養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟損失。

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