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Pipetty電動移液器在細菌內毒素檢查法中的應用_abio生物試劑品牌網

abiopp5個月前 (07-29)技術72

 
 
  • 取內毒素標準品5EU/ml一支,并加入1000μl檢查用水。
  • 在漩渦混合器上混勻15min。
  • 計算根據鱟試劑的靈敏度λ(如0.25EU/ml),用檢查用水將內毒素標準溶液稀釋成2λ。
 
 
 
(二)制備 供試品 溶液
1.計算有效稀釋倍數(MVD)
MVD=cL/λ
L為樣品的細菌內毒素限值(如葡萄糖注射液為0.5EU/ml)
c為供試品的濃度(如葡萄糖注射液為1.0ml/ml)
λ為鱟試劑的靈敏度(設為0.25EU/0.1ml)
MVD=1.0*0.5/0.25=2(倍)
2.取供試品500μl,加入檢測用水500μl,混合均勻備用。
(三)制備 樣品陽性對照溶液
1.取供試品溶液250μl,加入250μl檢查用水混合均勻,制成樣品的2倍稀釋液。2.將上述稀釋液與0.5EU/ml的內毒素溶液500μl混勻備用。
 
  • 鱟試劑的準備
準備鱟試劑(0.25EU/0.1ml)8支,并向每支鱟試劑中加入100μl檢查用水混勻備用。
 
  • 加樣
 根據下表加樣。
加樣表2
 
(六)檢測
加樣完畢后輕輕混勻,用封口膜密封試管口,置于37℃恒溫器中保溫1h觀察結果。
 
(七)結果判定
將安瓿輕輕取出,緩緩倒轉180°,若管內形成凝膠并且凝膠不變型、不滑落者為陽性。相反,則為陰性。當陰性對照組均為陰性,供試品陽性對照組均為陽性,陽性對照組均為陽性,試驗有效。
 
 

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