方案摘要：登革熱肆虐全球，及時診斷對診療和防控至關重要。本方案基于抗原 - 抗體特異性結合原理，利用熒光標記技術檢測病毒抗原或抗體（IgM/IgG），以血清為樣本，經處理、孵育、洗滌后，通過熒光顯微鏡判讀結果。檢測過程中，PIpetty 電動移液器優勢顯著，其內置溫度傳感器，可依溫度自動校正分配量，排除手溫干擾，保障移液精度；連續分液功能可將設定液量多次等量排出，大幅提升 96 孔板等加樣效率。提高早期檢測效率，助力疫情控制，保障公眾健康。?
 
 
方案詳情：
一、實驗原理
       某些熒光素(常用異硫氰酸熒光素)能與抗體蛋白分子結合，而不喪失抗體活力，仍能和相應的抗原發生特異免疫反應，產生免疫復合物，這種復合物由于有熒光色素的參與，在熒光顯微鏡下顯示熒光，表明有特異性抗原存在。直接免疫熒光法可用于檢測感染細胞內的特異性抗原，間接免疫熒光法可查待檢血清中的特異性抗體。
二、? 實驗準備
1、設配和材料
① Pipetty電動移液器MSIC01-03-250、MSIC01-02-1000及配套吸頭；
② 熒光顯微鏡。
 
2、試劑和材料
① 登革病毒 1~4 型抗原片（登革標準毒株感染 BHK、Vero 或 C6/36細胞制備，低溫干燥保存）及相應單克隆抗體（陽性對照）、陰性血清；
② 羊抗人（免抗人）IgG熒光抗體；
③ 待檢患者血清（急性期和恢復期）；
④ 常用稀釋液：pH7.2~7.4PBS、伊文斯蘭、封片膠等；
 
三、實驗步驟
1、取出抗原片，冷風吹干；
2、用 PH7.2~7.4 PBS 稀釋待檢血清，使用Pipetty自動混勻功能，從1∶20開始，對倍稀釋至所需稀釋度；
 
3、用Pipetty依次從高稀釋度向低稀釋度逐個加入稀釋的待檢血清于四個型的登革病毒抗原片孔中，每型各加2孔待檢系列稀釋血清，血清量以完全覆蓋抗原面而不溢出孔外為準，置濕盒內，在 37℃水浴孵育 30min（每次試驗同時作陰、陽性對照）;
4、用 pH7.2~7.4 PBS 漂洗3次，每次約 30s~1min，再用蒸餾水洗1次，冷風吹干；
5、用 pH7.2~7.4 PBS 稀釋熒光抗體，使其內含 2個工作單位和 1∶8000 伊文斯蘭的熒光抗體，加入各孔中，使完全覆蓋抗原面，置濕盒中，37℃水浴作用30min，取出，同上漂洗及吹干；
6、用封片膠（或甘油緩沖液）封片，熒光顯微鏡觀察結果。
四、試驗結果判讀
特異性熒光呈黃綠色顆粒，分布在感染細胞漿中。根據熒光亮度和陽性細胞在細胞總數中所占的比，無熒光者為“-”。檢測抗體滴度時，以特異熒光達“++”例可將熒光反應大致區分為“+~++++”最高血清稀釋度的倒數表示。