大小鼠曠場實驗(Open Field Test)原理及步驟_abio生物試劑品牌網(wǎng)
曠場實驗是一種經(jīng)典的行為學測試方法,主要用于評估嚙齒類動物(大鼠/小鼠)的 焦慮樣行為和 探索行為。
其原理基于:
1. 性與環(huán)境沖突:嚙齒類動物對新異環(huán)境具有天生的恐懼(傾向于躲避開放、明亮區(qū)域),同時具有探索新環(huán)境的本能。
2. ?焦慮與探索的權(quán)衡:焦慮水平高的動物會更多時間停留在邊緣區(qū)域(“安全區(qū)”),減少進入中央開放區(qū)域的探索行為;反之,低焦慮動物會更多探索中心區(qū)域。
3. ?運動活性:通過總移動距離和速度反映動物的活動水平,常用于評估藥物或應激對運動功能的影響。
?二、實驗步驟??
?1.實驗前準備??
? 設(shè)備:曠場裝置通常為正方形(大鼠:100×100 cm;小鼠:40×40 cm)或圓形場地,底部劃分網(wǎng)格或顏色分區(qū),周圍有圍欄防止逃跑。部分裝置配備攝像頭和追蹤軟件(如EthoVision)。
環(huán)境控制?:保持恒溫(22±1℃)、低光照(大鼠:約100 lux;小鼠:約50 lux),減少噪音干擾。
? ?清潔?:每次測試前用75%乙醇擦拭場地,避免氣味殘留影響后續(xù)測試。
?2.適應與測試? ?
??適應期??(可選):將動物置于測試間外靜置1-2小時,減少應激。
??放置動物 ??:將動物輕柔置于場地邊緣固定起始點(如角落),面向墻壁。
? ? 記錄參數(shù)??:
??1.總移動距離??:反映運動活性。
2.? ? 中央?yún)^(qū)停留時間??:中央?yún)^(qū)域占比(如大鼠中央20×20 cm區(qū)域)。
? ?3. 直立次數(shù)? :(前爪抬起):探索行為的指標。
? ?4.速度??:運動活躍度。
? ?5. 首次進入中央?yún)^(qū)潛伏期??:焦慮程度的敏感指標。
3. 數(shù)據(jù)分析??
對比不同組別(如藥物處理組 vs. 對照組)的中央?yún)^(qū)停留時間、移動距離等差異。
? 三、注意事項??
1. ?環(huán)境一致性?:同一實驗中所有測試條件(光照、溫度、清潔劑)需嚴格統(tǒng)一。
2. ?動物狀態(tài)?:
避免在動物飽食、哺乳期或疾病狀態(tài)下測試。
測試間隔至少24小時(多次測試時)。
3. ?人為干擾?:測試者需遠離場地,避免噪音或動作干擾動物。
4. ?數(shù)據(jù)標準化?:剔除異常數(shù)據(jù)(如跌倒、過度理毛導致的數(shù)據(jù)偏差)。
四、應用與變種? ?
?藥物篩選??:評估抗焦慮藥(如BDZ類藥物)或精神興奮劑(如安非他命)的效果。
?應激模型??:結(jié)合慢性應激實驗,研究抑郁/焦慮行為。
? 變種??:
?帶威脅刺激的曠場??(如頂部強光、電擊墊)增強焦慮誘導。
?曠場結(jié)合其他測試??(如高架十字迷宮)提高行為評估的效度。
五、常見問題?
Q.:動物總在邊緣活動是否一定代表高焦慮?
A.:需結(jié)合其他指標(如直立次數(shù)、中央?yún)^(qū)進入次數(shù))綜合判斷,邊緣活動也可能反映高警覺性而非焦慮。
Q:測試時長如何選擇?
A:常用5-30分鐘,一般5-10分鐘即可穩(wěn)定反映行為差異,過長可能導致疲勞。
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