ArrayJet生物芯片點樣儀助力慢性淋巴細胞白血病的蛋白標志物篩選_abio生物試劑品牌網(wǎng)
慢性B淋巴細胞白血病（B-CLL）是最常見的血液癌癥，具有高度的基因組異質(zhì)性，目前研究多集中在基因組和轉(zhuǎn)錄組水平，對蛋白質(zhì)組，尤其是蛋白磷酸化修飾的功能及影響了解甚微。蛋白磷酸化是調(diào)控細胞信號的翻譯后關(guān)鍵修飾，與 CLL 的信號通路密切相關(guān)，如 B 細胞抗原受體（BCR）的 tonic 信號傳導(dǎo)（低水平持續(xù)激活）在 CLL 發(fā)展中起關(guān)鍵作用，涉及 LYN、SYK 等酪氨酸激酶。現(xiàn)有治療如 BTK 抑制劑（伊布替尼）和 BCL-2 抑制劑（維奈托克）雖有效，但存在耐藥性和自身微環(huán)境影響等問題，且缺乏早期診斷和個性化治療的生物標志物。整合蛋白質(zhì)芯片和質(zhì)譜等高通量篩選技術(shù)為分析蛋白質(zhì)組的磷酸化提供了可能。
文章題目為“Tonic signaling of the B-cell antigen-specific receptor is a common functional hallmark in chronic lymphocytic leukemia cell phosphoproteomes at early disease stages”于2025年3月發(fā)表在Molecular Oncology雜志，作者來自于西班牙薩拉曼卡大學腫瘤研究中心。
在本研究中，19 例CLL樣患者（18 例 B-CLL 和 1 例 CLL ）為研究對象。首先采集外周血（PB），流式細胞儀純化 CD19?、CD5?的腫瘤 B 細胞，純度 > 98%，凍存于液氮中備用。隨后使用含尿素的裂解緩沖液（尿素、磷酸酶抑制劑等）裂解細胞，超聲處理后離心收集上清液，并測定蛋白濃度。通過磷酸酪氨酸抗體免疫親和法富集磷酸肽，使用質(zhì)譜儀分析總蛋白和磷酸化肽段。蛋白組分析檢測到 13,504 個獨特肽段，對應(yīng) 2,970 個蛋白質(zhì)，其中 28 個為新發(fā)現(xiàn)蛋白；蛋白磷酸化分析鑒定到 594 個磷酸肽段，對應(yīng) 316 個磷酸化蛋白，包括 55 個新發(fā)現(xiàn)磷酸肽段。 英國ArrayJet生物芯片點樣儀制備蛋白質(zhì)芯片，檢測磷酸化蛋白表達。將 208 種抗體（靶向 162 種蛋白）點印在氨基修飾的玻片上，隨后孵育生物素標記的蛋白以及Cy5標記的鏈霉親和素， 雜交后使用熒光芯片掃描儀進行熒光信號分析。
圖1：實驗流程，從蛋白質(zhì)組學和磷酸化蛋白質(zhì)組學分析到親和蛋白質(zhì)組學（蛋白質(zhì)微陣列）和WB驗證。B-CLL： b細胞慢性淋巴細胞白血病；CLL：慢性淋巴細胞白血病；ESI-HCD：高能碰撞解離的電噴霧電離；（ESI）LC-MS /MS：液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜；MBL：單克隆b細胞淋巴細胞增多癥；PTM：翻譯后修飾；WB,：western blot。
研究發(fā)現(xiàn)在2160個共表達蛋白中，有10%（220 個）發(fā)生了磷酸化，其主要參與 B 細胞激活和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)；BCR的 tonic 信號傳導(dǎo)和 NF-κB/STAT3 通路是 CLL 和 MBL 磷酸化組的共同特征。55 個新磷酸肽的發(fā)現(xiàn)擴展了 CLL 磷酸化組數(shù)據(jù)庫，為機制研究提供了可能的潛在靶點，并發(fā)現(xiàn)9 個磷酸化蛋白（如 BTK、SYK）與早期疾病階段高度相關(guān)，可用于預(yù)后評估和治療監(jiān)測。整合多組學技術(shù)（質(zhì)譜、蛋白質(zhì)篩選芯片），提供了CLL蛋白質(zhì)組和磷酸化組的全景圖譜，為理解疾病異質(zhì)性、開發(fā)新型生物標志物奠定了基礎(chǔ)。
原文鏈接： https://febs.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/1878-0261.70032
Arrayjet位于英國愛丁堡，專注于提供生物芯片應(yīng)用領(lǐng)域的解決方案及服務(wù)。自2000年公司成立即致力于開發(fā)新型生物樣品噴點方案–噴墨式液體處理平臺，該系統(tǒng)于2006年上市，目前用戶遍布全球27個國家。
Mercury系列產(chǎn)品采用獨特的飛行噴墨點樣技術(shù)實現(xiàn)行業(yè)第一的快速、非接觸式微量液體處理。同時上萬種不同樣品可以進行快速點樣，專利的上樣模塊配合高通量的點樣噴頭保障您的點樣操作快速、無污染，更低的上樣體積可有效減少樣品損失，使您的珍貴樣品物盡其用。
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環(huán)亞生物科技有限公司
地址：上海市松江區(qū)莘磚公路518號9幢502室
電話：021-54583565
郵箱： info@apgbio.com
網(wǎng)址： www.apgbio.com
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文章題目為“Tonic signaling of the B-cell antigen-specific receptor is a common functional hallmark in chronic lymphocytic leukemia cell phosphoproteomes at early disease stages”于2025年3月發(fā)表在Molecular Oncology雜志，作者來自于西班牙薩拉曼卡大學腫瘤研究中心。
在本研究中，19 例CLL樣患者（18 例 B-CLL 和 1 例 CLL ）為研究對象。首先采集外周血（PB），流式細胞儀純化 CD19?、CD5?的腫瘤 B 細胞，純度 > 98%，凍存于液氮中備用。隨后使用含尿素的裂解緩沖液（尿素、磷酸酶抑制劑等）裂解細胞，超聲處理后離心收集上清液，并測定蛋白濃度。通過磷酸酪氨酸抗體免疫親和法富集磷酸肽，使用質(zhì)譜儀分析總蛋白和磷酸化肽段。蛋白組分析檢測到 13,504 個獨特肽段，對應(yīng) 2,970 個蛋白質(zhì)，其中 28 個為新發(fā)現(xiàn)蛋白；蛋白磷酸化分析鑒定到 594 個磷酸肽段，對應(yīng) 316 個磷酸化蛋白，包括 55 個新發(fā)現(xiàn)磷酸肽段。 英國ArrayJet生物芯片點樣儀制備蛋白質(zhì)芯片，檢測磷酸化蛋白表達。將 208 種抗體（靶向 162 種蛋白）點印在氨基修飾的玻片上，隨后孵育生物素標記的蛋白以及Cy5標記的鏈霉親和素， 雜交后使用熒光芯片掃描儀進行熒光信號分析。
圖1：實驗流程，從蛋白質(zhì)組學和磷酸化蛋白質(zhì)組學分析到親和蛋白質(zhì)組學（蛋白質(zhì)微陣列）和WB驗證。B-CLL： b細胞慢性淋巴細胞白血病；CLL：慢性淋巴細胞白血病；ESI-HCD：高能碰撞解離的電噴霧電離；（ESI）LC-MS /MS：液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜；MBL：單克隆b細胞淋巴細胞增多癥；PTM：翻譯后修飾；WB,：western blot。
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原文鏈接： https://febs.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/1878-0261.70032
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