血凝素 - 神經(jīng)氨酸酶蛋白（Hemagglutinin-Neuraminidase, HN）

• 結(jié)構(gòu)特點：糖蛋白二聚體，兼具血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）活性（與流感病毒的 HA 和 NA 獨(dú)立存在不同）。
• 功能： 
  • HA 活性：識別宿主細(xì)胞表面的唾液酸受體，介導(dǎo)病毒吸附；
  • NA 活性：水解唾液酸殘基，促進(jìn)病毒粒子從宿主細(xì)胞釋放，與病毒擴(kuò)散相關(guān)；
  • 是疫苗研發(fā)的主要抗原靶點，其抗原性變異可影響病毒的宿主范圍和致病性。

融合蛋白（Fusion Protein, F）

• 結(jié)構(gòu)特點：由無活性的 F0 前體蛋白經(jīng)宿主蛋白酶切割為 F1 和 F2 亞基，形成三聚體。
• 功能： 
  • 介導(dǎo)病毒包膜與宿主細(xì)胞膜的融合，促進(jìn)病毒基因組進(jìn)入細(xì)胞；
  • F 蛋白的切割位點氨基酸序列是決定 NDV 致病性的關(guān)鍵因素：高致病性毒株（如 Velogenic 型）的切割位點含多個堿性氨基酸（如 RRQKRF），可被多種宿主蛋白酶識別，導(dǎo)致全身感染；低致病性毒株（如 Lentogenic 型）的切割位點僅含單個堿性氨基酸，僅在呼吸道或腸道局部復(fù)制。

核蛋白（Nucleocapsid Protein, NP）

• 功能：包裹病毒 RNA，形成螺旋狀核衣殼（RNP），保護(hù)基因組并為聚合酶提供模板。

磷蛋白（Phosphoprotein, P）

• 功能：作為聚合酶復(fù)合體的輔助蛋白，參與 RNA 依賴的 RNA 聚合酶（RdRP）的組裝與活性調(diào)節(jié)，同時具有抗宿主干擾素的作用。

大聚合酶蛋白（Large Polymerase Protein, L）

• 功能：病毒的 RdRP，負(fù)責(zé)基因組 RNA 的復(fù)制和 mRNA 的轉(zhuǎn)錄，活性依賴于 P 蛋白的輔助。

F 蛋白切割位點的致病性決定作用

• 如前文所述，F(xiàn)0 切割位點的堿性氨基酸數(shù)量直接影響病毒的毒力： 
  • 強(qiáng)毒株（Velogenic）：切割位點含 4-5 個連續(xù)堿性氨基酸（如 RRQKRF），可被全身各組織的蛋白酶（如弗林蛋白酶）識別，導(dǎo)致多器官感染和高死亡率；
  • 弱毒株（Lentogenic 或 Mesogenic）：切割位點僅含 1-2 個堿性氨基酸（如 GRQGR/L），僅在呼吸道或腸道被局部蛋白酶切割，引起輕微癥狀或隱性感染。

HN 蛋白與宿主受體的相互作用

• HN 蛋白對唾液酸受體的結(jié)合特異性影響病毒的宿主范圍：NDV 主要感染禽類，但部分毒株可通過 HN 蛋白變異獲得感染哺乳動物（如人、豬）的能力（盡管概率較低）。

V/W 蛋白的免疫逃逸功能

• V 蛋白可結(jié)合宿主細(xì)胞內(nèi)的 STAT1 蛋白，阻斷干擾素誘導(dǎo)的信號傳導(dǎo)，降低宿主抗病毒免疫應(yīng)答，促進(jìn)病毒復(fù)制。

疫苗研發(fā)核心靶點

• 活疫苗：常用弱毒株（如 La Sota、F 系），其 F 蛋白切割位點為低致病性序列，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對 F 和 HN 蛋白的中和抗體，提供黏膜免疫和體液免疫；
• 滅活疫苗：以強(qiáng)毒株或基因工程重組 F/HN 蛋白為抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫，常用于蛋雞和種雞的強(qiáng)化免疫。

診斷技術(shù)中的蛋白應(yīng)用

• 血凝抑制試驗（HI）：利用 HN 蛋白的血凝活性，通過特異性抗體抑制紅細(xì)胞凝集，用于病毒分型和抗體檢測；
• ELISA 檢測：以 NP、F 或 HN 蛋白為抗原，檢測血清中的特異性抗體，用于流行病學(xué)調(diào)查；
• 基因工程抗原：重組 F 或 HN 蛋白可用于快速診斷試紙條的制備，提高檢測靈敏度。