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DSS誘導結腸炎造模教學及不同分子量的應用異同點_abio生物試劑品牌網

abiopp5個月前 (08-05)技術138
DSS?結腸炎造模的經典化合物!
然鵝,DSS 分子量多變:太小,誘導的炎癥較輕;太大,則難以穿透腸黏膜。
小小 DSS 誘導疾病造模也是大有門道兒,快來隨小 M 一起來看看吧~

Section.01
DSS 誘導結腸炎模型

DSS:

硫酸葡聚糖鈉鹽 (Dextran sulfate sodium salt),是一種水溶性的帶負電荷的硫酸化多糖,葡聚糖的聚陰離子衍生物, 分子量高度可變,不同分子量的 DSS 具有不同的生物活性 ,常見的 DSS 分子量為 5,000-550,000 Da。

研究結腸炎的小伙伴們可能都知道,DSS 是經典的結腸炎造模的化合物,可用于誘發急性/慢性結腸炎/結腸炎相關的結腸癌模型。Butttttt! DSS 分子量過小,誘導的炎癥較輕,分子量過大,則難以穿透腸黏膜。

目前最為常用的,是在飲用水中添加一定濃度的  DSS (分子量 36,000-50,000 Da) ,其誘導的小鼠結腸炎較為嚴重,且與人類潰瘍性結腸炎最為相似。

言而總之,總而言之,使用 DSS  (36,000-50,000 Da)  誘導結腸炎模型快速、簡便、具有可重復和可控性,因而在炎癥性腸病  (BD)  研究中非常流行。此外,通過改變 DSS 的濃度和給藥周期及頻率,或與其他藥物聯用,可實現急性/慢性腸道炎癥、結腸炎相關的結腸癌模型的造模 [1] 。

小 M 為大家整理了使用 DSS  (36,000-50,000 Da)  誘導疾病模型的原理、方案和檢測驗證指標,大家可自行參考喔~

DSS  (36,000-50,000 Da)  造模原理、方案和檢測
 

圖 1.  DSS (36,000-50,000 Da)   誘導不同結腸炎模型的實驗周期[2][3][4][5][6[7]。

Section.02
DSS 造模: 注意事項有哪些?

造模歸造模,熱乎勁上來了也要先看完這七大注意事項哇,寶子們?。。?/span>

造模小貼士
日常換水:建議每 1-2 天更換含 DSS 的飲用水,飲水量可以按照小鼠每天 7-10 mL,大鼠每天 11 mL/100 g 體重來計算,并檢查水瓶無堵塞、漏液發生。
做好記錄:每日記錄飲水量、確認飲水量是否正常,記錄體重以及疾病表型,病理切片建議取肛門附近 1-2 cm 段。
預實驗:DSS 溶液的濃度、動物的種類和品系可能都會影響造模效果,建議通過預實驗確定造模最佳濃度。
誘發年齡:成功且易于重復地誘發 DSS 結腸炎的最佳年齡范圍為 6-8 周,雄鼠可能比雌鼠更敏感。
動物管理:為了減小飲水量差異,并更清楚地觀察造模進展,建議每個籠子 2-3 只動物,每籠不超過 5 只動物。
DSS 分子量:有研究表明,36,000-50,000 Da 是建立結腸炎模型的最佳 DSS 分子量范圍。DSS 分子量過低,會導致炎性作用較弱,而分子量過大會導致吸收越困難[8][9]。
AOM 劑量:根據實驗室、小鼠設施和小鼠背景的不同,AOM 的影響可能有所不同。建議使用不同劑量的 AOM (7.5-12.5 mg/kg) 進行預實驗。AOM 導致的死亡通常在注射后 24 至 72 小時內觀察到。


Section.03
MCE 實驗驗證

實驗方案
  • 驗組別:雄性 C57BL/6 小鼠 (7-8 周),n=5 (空白組) 或 7 (實驗組);
  • 急性結腸炎模型:2% DSS (36,000-50,000 Da),飲水 7 天后取材;
  • 檢測指標:疾病表型,體重變化,結腸長度,結腸 HE 染色。
 
實驗結果


圖 2. DSS (2%, 飲用水,7 天) 誘導急性結腸炎模型。
A.7 天內的體重變化,7 天后體重減輕約 20%。B. 疾病活躍指數評分。C. 7 天后取結腸,并測量結腸長度,結果顯示結腸縮短。D. 結腸拍照。E. 遠端結腸 HE 染色,結果顯示重度炎癥,炎癥浸潤到黏膜下層并透壁,隱窩丟失大于 1/3,杯狀細胞丟失。

Section.04
其他分子量的 DSS

看到這里,想必大家都已經記住了造結腸炎模型用的是  DSS(36,000-50,000 Da) ,那么其他分子量的 DSS 又有什么用途呢? (更多信息參考可登錄 MCE 官網 查詢~)

不同分子量 DSS 的常見應用
 


 
不同分子量 DSS 的用途
比較



 

Section.05
小結

今天小 M 給大家提供了保姆式結腸炎造模教學,還順便給大家整理了不同分子量的應用異同點。如果覺得這篇干貨秘籍有幫助,別忘了收藏,點贊、分享哦~

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抗凝劑,補體抑制劑。

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結腸致癌物質,可與 DSS 聯用造結腸癌模型。




[1] ChassAIng B, et al. Dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis in mice. Curr Protoc Immunol. 2014 Feb 4;104:15.25.1-15.25.14.
[2] Kinchen J, et al. Structural Remodeling of the Human Colonic Mesenchyme in Inflammatory Bowel Disease. Cell. 2018 Oct 4;175(2):372-386.e17.
[3] Zhang H, et al. Biochanin a ameliorates DSS-induced ulcerative colitis by improving colonic barrier function and protects against the development of spontaneous colitis in the Muc2 deficient mice. Chem Biol Interact. 2024 May 25;395:111014.
[4] Dokoshi T, et al. Dermal injury drives a skin to gut axis that disrupts the intestinal microbiome and intestinal immune homeostasis in mice. Nat Commun. 2024 Apr 8;15(1):3009.
[5]. Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007;2(3):541-6.
[6]. Zhu H, et al. RNA virus receptor Rig-I monitors gut microbiota and inhibits colitis-associated colorectal cancer. J Exp Clin Cancer Res. 2017 Jan 5;36(1):2.
[7] Parang B, et al. AOM/DSS Model of Colitis-Associated Cancer. Methods Mol Biol. 2016;1422:297-307.
[8] Kitajima S, et al. Histological analysis of murine colitis induced by dextran sulfate sodium of different molecular weights. Exp Anim. 2000 Jan;49(1):9-15.
[9] Lu G, et al. Dextran Sulfate Protects Pancreatic β-Cells, Reduces Autoimmunity, and Ameliorates Type 1 Diabetes. Diabetes. 2020 Aug;69(8):1692-1707.
 


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