《J. Adv. Res.》論文發(fā)表 | 肝癌細(xì)胞中類泛素蛋白FAT10通過加速VEGF非依賴性血管生成來限制抗VEGF治療療效

文獻(xiàn)信息
南昌大學(xué)附屬第二醫(yī)院普通外科、南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院江西省分子醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等團(tuán)隊(duì)的研究成果“The ubiquitin-like protein FAT10 in hepatocellular carcinoma cells limits the efficacy of anti-VEGF therapy by accelerating VEGF-independent angiogenesis”（肝癌細(xì)胞中的類泛素蛋白FAT10通過加速VEGF非依賴性血管生成來限制抗VEGF治療的療效）在學(xué)術(shù)期刊《Journal of Advanced Research》（IF：11.4）上發(fā)表。平生公司的離活一體CT（NEMO）在論文中提供了重要的小鼠腫瘤血管圖像和定量分析結(jié)果。

該論文的通訊作者為邵江華教授。

文獻(xiàn)摘要
引言：抗血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）治療的療效有限。然而，限制抗VEGF治療療效的關(guān)鍵因素及其潛在機(jī)制尚不清楚。

目的：探討泛素樣蛋白人類白細(xì)胞抗原F位點(diǎn)鄰近轉(zhuǎn)錄物10（FAT10）在限制肝細(xì)胞癌（HCC）細(xì)胞抗VEGF治療療效方面的作用和機(jī)制。

方法：使用簇狀規(guī)則間隔短回文重復(fù)序列（CRISPR）-CRISPR相關(guān)蛋白9技術(shù)在HCC細(xì)胞中敲除FAT10。貝伐單抗（BV）是一種抗VEGF單克隆抗體，用于評估體內(nèi)抗VEGF治療的療效。通過RNA測序、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶下拉試驗(yàn)和體內(nèi)泛素化試驗(yàn)評估FAT10作用機(jī)制。

結(jié)果：FAT10加速了HCC細(xì)胞中VEGF非依賴性血管生成，限制了BV的療效，BV加重了缺氧，炎癥促進(jìn)了FAT10的表達(dá)。FAT10過表達(dá)增加了HCC細(xì)胞中參與多種信號通路的蛋白質(zhì)水平，導(dǎo)致VEGF和多種非VEGF促血管生成因子上調(diào)。多種FAT10介導(dǎo)的非VEGF的上調(diào)信號補(bǔ)償了BV對VEGF信號傳導(dǎo)的抑制、增強(qiáng)VEGF非依賴性血管生成和促進(jìn)HCC生長。

結(jié)論：作者的臨床前研究發(fā)現(xiàn)，HCC細(xì)胞中的FAT10是限制抗VEGF治療療效的關(guān)鍵因素，并闡明了其潛在機(jī)制。這項(xiàng)研究為抗血管生成療法的發(fā)展提供了新的機(jī)制見解。

實(shí)驗(yàn)方法
Balb/c裸鼠在吸入二氧化碳處死前10分鐘接受50ml肝素腹腔注射。通過升主動脈注射造影劑。然后用微型CT掃描系統(tǒng)（NEMO micro-CT，平生醫(yī)療科技有限公司）對腫瘤進(jìn)行成像。掃描電壓60 kV，掃描電流為0.2 mA。通過一系列圖像處理步驟提取血管和腫瘤。基于閾值選取，CT值大于1500HU的為血管（VV），CT值大于58UH為腫瘤整體（TV）。血管密度（VV/TV）由VV與TV的比值確定。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果
微計(jì)算機(jī)斷層掃描（micro-CT）的血管成像顯示，在第四周，BV治療的FAT10^+/+HCCLM3腫瘤模型中的腫瘤新生血管與未治療組相比沒有顯著差異（圖3B）。在第六周，通過顯微CT觀察到，與未經(jīng)治療的對照組相比，BV治療的FAT10^+/+HCCLM3腫瘤模型中的腫瘤血管生成顯著減少（圖3D）。顯微CT分析顯示，第五周聯(lián)合治療后新生血管減少（圖3J）。

圖3 抑制BV誘導(dǎo)的VEGF非依賴性血管生成通過抑制HCC細(xì)胞中多種FAT10介導(dǎo)的非VEGF信號來增強(qiáng)其療效。B在HCCLM3腫瘤組織中進(jìn)行了腫瘤新生血管的Micro-CT分析（n=4）。NS：不顯著。D在FAT10/HCCLM3腫瘤組織中進(jìn)行了腫瘤新生血管的Micro-CT分析（n=4）*p<0.05。J對腫瘤新生血管進(jìn)行了顯微CT分析。

使用設(shè)備

 Micro CT (型號：NEMO) (平生醫(yī)療科技)
 影像軟件：Avatar（平生醫(yī)療科技）