鏈霉親和素的主要作用與核心優(yōu)勢_abio生物試劑品牌網(wǎng)
將Hela細胞與抗微管蛋白的鼠抗體以及生物素標記的抗鼠 IgG 的山羊抗體一起孵育,隨后加入得克薩斯紅?-鏈霉親和素偶聯(lián)物(紅色)。細胞核用 Hoechst 33342 染色(藍色,貨號 17530)。
一、主要作用
1. 生物素結(jié)合與信號放大
鏈霉親和素能特異性結(jié)合生物素,形成幾乎不可逆的復合物
應(yīng)用場景:
檢測技術(shù):ELISA、Western blot、免疫熒光中,通過生物素標記的抗體與鏈霉親和素偶聯(lián)的酶/熒光染料結(jié)合,放大檢測信號。
2.分子固定
將生物素標記的DNA、蛋白質(zhì)固定在鏈霉親和素包被的載體(如磁珠、芯片)上。
3. 親和純化
通過生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)純化目標分子(如生物素標記的蛋白質(zhì)、核酸),例如在Pull-down實驗或CRISPR基因編輯中捕獲特定DNA片段。
4. 納米技術(shù)與診斷
用于構(gòu)建生物傳感器、納米材料自組裝,或診斷試劑盒中作為信號放大模塊(如化學發(fā)光檢測)。
二、核心優(yōu)勢
1. 超高親和力
生物素結(jié)合力強于抗體-抗原相互作用,確保實驗的穩(wěn)定性和靈敏度。
2. 低非特異性結(jié)合
鏈霉親和素為中性蛋白(不帶強電荷),而親和素(Avidin)因帶正電荷易與細胞膜等負電物質(zhì)結(jié)合,導致高背景。鏈霉親和素的低背景特性使其更適合高精度實驗。
3. 穩(wěn)定性強
耐高溫(70–80°C)、抗變性劑(如SDS、尿素),可在苛刻條件下使用。
4. 四價結(jié)合能力
四聚體結(jié)構(gòu)允許同時結(jié)合4個生物素分子,增強信號放大(如多酶復合物標記)。
5. 低免疫原性與毒性
鏈霉親和素無糖基化,而親和素(來自蛋清)可能引發(fā)免疫反應(yīng),因此鏈霉親和素更適合體內(nèi)實驗或臨床診斷。
6. 靈活的功能化
易與熒光染料、酶(HRP、AP)、磁珠等偶聯(lián),形成多功能工具復合物。
三 、儲存方式
儲存條件:收到后,將凍干粉末儲存在<-15℃,并避免光照和潮濕。 準備使用時,將含有0.1%牛血清白蛋白的ddH2O加入小瓶中,得到1mg / mL儲備液。當在2mM疊氮化鈉存在下儲存并且在4℃下避光時,該重構(gòu)溶液保持穩(wěn)定兩個月而沒有顯著變化。對于更長時間的儲存,重構(gòu)溶液可以分成單次使用的等分試樣,或者加入等體積的溶液。不等分的甘油(終濃度為50%),并將溶液儲存在-20℃(避光)。該產(chǎn)品在-20℃下穩(wěn)定1年。
注:對于所有RPE,APC和PerCP重建的綴合物將它們儲存在2-6℃(不要冷凍)。
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